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圓偏振熒光在發(fā)光材料、生物蛋白、信息顯示存儲(chǔ)、電子學(xué)、非線性光學(xué)等領(lǐng)域有廣 泛的用途和應(yīng)用前景,引起科學(xué)家極大的關(guān)注和興趣。采用圓偏振熒光光譜儀可提供分子 激發(fā)態(tài)的結(jié)構(gòu)信息,表征聚合物結(jié)構(gòu),成為研究有機(jī)化合物的立體構(gòu)型的一個(gè)重要方法。 工作原理: 光是一種電磁波,可用振動(dòng)的電場(chǎng)和與之垂直的磁場(chǎng)來(lái)描述,若光波在其傳播途徑中具 體某一點(diǎn)上只有一個(gè)振動(dòng)方向,但振動(dòng)方向隨光波的傳播而有規(guī)律的偏轉(zhuǎn)一定角度但振幅不 變,其電場(chǎng)矢量末端的運(yùn)動(dòng)軌跡為螺旋狀,該螺旋的橫截面為圓形,這種偏振光為圓偏振光。 人們?cè)趫A二色的基礎(chǔ)上,發(fā)現(xiàn)圓偏振熒光的左、右圓偏振光的強(qiáng)度不同。通常以左、右圓偏 振熒光的強(qiáng)度差 CPL=△F= FL-FR,作為圓偏振熒光的量度
之前文獻(xiàn)報(bào)道的圓偏振熒光檢測(cè)都是在相關(guān)科研工作者自己設(shè)計(jì)和建造的儀器上進(jìn)行的。 直到 1972 年以色列魏茨曼科技學(xué)院 Steinberg 和Gafni (SG) 提出圖 一 A所示的圓偏振熒光 調(diào)制測(cè)量方法,基本組成部分為:激發(fā)源、單色器、樣品、光學(xué)彈性調(diào)制器、偏光片、發(fā)射 單色器、光電倍增管、鎖相放大器及計(jì)算機(jī)。該方法將調(diào)制后的光電信號(hào)和 PEM 光學(xué)彈性 調(diào)制器信號(hào)輸入給鎖相放大器,通過(guò)二者頻率與相位鎖相從熒光中提取圓偏振熒光。 1982 年荷蘭萊頓大學(xué)的 Schippers,van den Beukle 和 Dekkers (SBD)提出了圖 一 B 所示 的圓偏振熒光測(cè)量方法,該方法利用光子計(jì)數(shù)取代鎖相放大器,解決了鎖相放大器的輸出不 穩(wěn)定問(wèn)題。其后復(fù)雜蛋白結(jié)構(gòu)測(cè)量主要采用的是該方法,但是對(duì)于弱的圓偏振熒光測(cè)量還是 速度很慢。 1992-1995 年期間,隨著 TDC 時(shí)間數(shù)字轉(zhuǎn)換器等電子技術(shù)的發(fā)展,美國(guó)密西根大學(xué)的 Schauerte,Steel,和 Gafni (SSG) 進(jìn)一步提出了圖 一 C 所示的圓偏振熒光直接相減測(cè)量方 法。該方法采用 DGG 延遲選通脈沖發(fā)生器,分別測(cè)量△F= FL-FR 公式中的 FL 左圓偏振熒 光和 FR 右圓偏振熒光,兩者相減直接得到真正的圓偏振熒光△F,利用公式 glum=2(FL-FR) /(FL+FR)求得不對(duì)稱因子。該方法同時(shí)解決了以上兩種方法中鎖相環(huán)輸出不穩(wěn)定與測(cè)量 速度慢的問(wèn)題,使用該方法商業(yè)化生產(chǎn)的圓偏振熒光光譜儀主要是美國(guó) Olis 公司。
CPL工作原理